Inhaltszusammenfassung:
Das Ca2+-Gleichgewicht des Körpers wird durch das Zusammenspiel von intestinaler und renaler Feinregulation aufrechterhalten. Der epitheliale Calciumkanal TRPV5 spielt besonders bei der renalen Resorption von Ca2+ eine entscheidende Rolle.
In dieser Arbeit konnte durch elektrophysiologische und Lumineszenz-Messungen gezeigt werden, daß TRPV5 durch die Proteinkinase S422DSGK1 in Anwesenheit des Gerüstproteins NHERF2 aufreguliert wird. Dieser stimulierende Effekt wird durch eine Erhöhung der Abundanz des Kanals in der Plasmamembran erzielt. Für die Aktivierung von TRPV5 ist die katalytische Domäne der Proteinkinase notwendig. Die Zerstörung der SGK1-Konsensussequenz auf TRPV5, die eine putative Phosphorylierungsstelle darstellt, hob die Aktivierung des Kanals durch S422DSGK1 und NHERF2 auf. „Overlay“- und „Pull-down“- Experimente zeigten, daß der C-Terminus von TRPV5 Ca2+-unabhängig mit NHERF2 interagiert. Darüber hinaus konnten wir durch elektrophysiologische und Lumineszenz-Messungen demonstrieren, daß die zweite PDZ-Domäne auf NHERF2 für die Aktivierung von TRPV5 durch S422DSGK1 notwendig ist.
Durch unsere Untersuchungen konnten somit wichtige Erkenntnisse bezüglich der renalen Ca2+-Regulation gewonnen werden.
Weiterführende Untersuchungen zur Interaktion von TRPV5, NHERF2 und S422DSGK1 bieten sich an.